Líffræðileg smásjárskoðun á rúmmáli vefjablokka
Lífsmásjárskoðun Hingað til eru ísköld festing, frosnir ofurþunnir hlutar og frosnir þurrir meðhöndlun venja aðferðir við röntgengeislun á vefjum og frumum. Upplýsingar um aðferðina eru útskýrðar í eftirfarandi liðum:
Líffræðilegar smásjár Hægt er að færa smásjár með eimsvalarlinsu upp og niður til að ná í meðallagi birtu eða breyta ljósopi breytilegra ljósstækkara til að ná meðallagi 9b birtu. Ef ljósið er sólríkt er hægt að hækka blettasviðið á viðeigandi hátt og stækka ljósop breytilegu ljóssins á viðeigandi hátt. Ef ljósið er of sterkt, þá getur sviðsljósspegillinn verið viðeigandi niður, ljósopið á breytilegu ljósstökkinu fyrir viðeigandi minnkun. Ef í þessu tilviki finnst enn geigvænlegt, þá geturðu valið viðeigandi síu sem er sett í krappann undir sviðsljósinu. Þetta er hægt að fá til að gera þig ánægðan með birtustigið. Auðvitað, við aðlögun á efri og neðri stöðu eimsvalarlinsunnar getur verið mismunandi stærð ljósops ljóslesturs og val á viðeigandi síum, það er eftir ákveðinn tíma af æfingu og reynslu.
Líffræðileg smásjá Mjög mikilvægt atriði er í ferli sýnatöku og aðskilnaðar frumna, frostþurrkun og plastefnisífellingu (FD) eftir frystingu öfgabæklinga, frostþurrkun eftir fíngerð hvern hluta 65 frumefnasamsetningar innihaldsins verður að vera meðhöndluð mjög varlega og má ekki skemma frumurnar sem á að skoða og greina. Vegna þess að röntgengeisla örsvæðisgreiningin er ekki aðeins mörg skref, og kostnaðurinn er mjög hár, ef eftir langan tíma og mörg skref vinnslu eru greindar frumur skemmdar frumur eða dauðar frumur, til að draga rangar ályktanir er mjög miður. Til dæmis hafa hjartavöðvafrumur sem einangraðar eru með kollagenasameðferðinni tvær formgerðir, önnur er langur stangarlaga og hin er kringlótt. Þær síðarnefndu eru deyjandi frumur sem skemmdust við frumueinangrun.
Lífsmásjárgreiningar Innihald og dreifing raflausna í þessum tveimur tegundum frumna er mjög mismunandi. Na var mjög hátt og K mjög lágt í kringlóttu hjartavöðvafrumunum og styrkur ca var mjög hár í hvatberum. Eftir að hafa athugað með öðrum greiningaraðferðum kom í ljós að hátt Na og lágt K í kringlóttu frumunum og hátt ca í hvatberum voru afleiðing af skemmdum á frumuhimnu við frumuskilnað. Köld festing frumna og vefja fer oft fram með slökkvifestingu og síðan varðveislu í fljótandi köfnunarefni. Slökkvandi festing er mikilvæg fyrir skilvirkni varðveislu. Lifandi frumur eða ferskur vefur eru ríkur af vatni, þegar slökkun er oft frumur eða vefir og kuldamiðillinn (sérstaklega með fljótandi köfnunarefni hreinum köldu) beinni snertingu við hluta fyrstu frostfestingarinnar og myndar þannig "skel", sem kemur í veg fyrir kuldafestingu miðju frumunnar. Afleiðingin er sú að ískristallar finnast oft í miðju stærri frumna við röntgengeisla örfrumugreiningu. Til að koma í veg fyrir að þetta gerist eru efni með hærra bræðslumark en fljótandi köfnunarefni en lægra en 806c þurrt notuð sem kæliefni. Það eru mörg slík efni, en * auðvelt að fá, ódýrt er þétt própan (suðumark 42,120c, bræðslumark 187,10c, mólþyngd 44,1), kælihraði * hratt. Hins vegar hefur það þann ókost að vera eldfimt.
Líffræðileg smásjá er hægt að setja á sérstaka hillu vöðvaþræði, þannig að vöðvaþræðir samdráttur til að ná ákveðnum tímafasa þarf að laga, byrjaðu strax stútinn, þannig að vökvaprópanið til vöðvaþráða þotunnar, þannig að slökkva á kuldinn lagaður. Síðan eru vöðvaþræðir teknir út ásamt grindinni og settir í fljótandi köfnunarefni. Ef festa blóðfrumur eða einangruð frumur, fyrst lághraða skilvindu til að gera frumurnar einbeittar, frumurnar verða fluttar í góða hitaleiðni silfurrörsins, rörið inn í fljótandi própan skrokkinn kalt fastur. Hall rannsóknarstofu fastur rottum brisi, fyrstu tveir stykkin af stáli með fljótandi helíum (eða fljótandi köfnunarefni) forkælingu, með klemmu klemmdu, verða tveir koparstykkin sett fyrir framan og aftan brisið, þannig að frænka kirtilslökkvandi kuldafesting. Hægt er að geyma vefi eða frumur í fljótandi köfnunarefni í langan tíma eftir að þær eru slökkt og festar.
