Þekking sem tengist confocal fluorescence smásjá

Jun 10, 2024

Skildu eftir skilaboð

Þekking sem tengist confocal fluorescence smásjá

 

Grundvallarreglan við confocal flúrljómunarsmásjárskoðun er að nota punktljósgjafa til að geisla sýnið og mynda vel afmarkaðan lítinn blett á brenniplaninu. Flúrljómunin sem bletturinn gefur frá sér eftir geislun er safnað af hlutlinsunni og sendur aftur í litrófsmælirinn sem samanstendur af tvíátta litspegli eftir upprunalegu geislunarbrautinni. Litrófsmælirinn sendir flúrljómun beint til skynjarans. Það eru tvö göt fyrir framan ljósgjafann og skynjarann, hver um sig kölluð lýsingarpinhole og skynjunarpinhole. Rúmfræðilegar stærðir þessara tveggja eru í samræmi, um 100-200nm; Í samanburði við ljóspunktinn á brenniplaninu, eru þeir tveir samtengdir, sem þýðir að ljóspunkturinn fer í gegnum röð linsa og getur að lokum einbeitt sér að bæði lýsingu pinhole og skynjun pinhole samtímis. Þannig getur ljós frá brenniplaninu safnast saman innan sviðs skynjunargatsins, en dreifð ljós ofan eða neðan brenniplansins er lokað fyrir utan skynjunargatið og ekki hægt að mynda það. Með því að skanna sýnishornið punkt fyrir punkt með leysir, fær ljósmargfaldarrörið eftir að hafa greint pinhole einnig samsvarandi confocal mynd af ljósinu punkt fyrir punkt, sem er breytt í stafrænt merki og sent til tölvunnar. Að lokum er skýr confocal mynd af öllu brenniplaninu samsett á skjánum.


Hver brenniplansmynd er í raun sjónræn þversnið af sýninu, sem hefur alltaf ákveðna þykkt, einnig þekkt sem sjónþunnur hluti. Vegna þess að ljósstyrkur við brennipunktinn er mun meiri en í brennipunktinum, og ljósið sem ekki er brennivíti er síað út með götum, er dýpt sjóndeildarhringsins um það bil núll. Með skönnun meðfram Z-ás stefnu er hægt að ná sjónsneiðmynd, sem myndar tvívíða sjón sneið á brennipunkti sýnisins sem sést. Með því að sameina XY plan (fókusplan) skönnun og Z-ás (sjónás) skönnun er hægt að fá þrívíddarmynd af sýninu með því að safna saman samfelldum lögum af tvívíðum myndum og vinna úr þeim með sérhæfðum tölvuhugbúnaði.


Uppgötvunargatið og ljósgjafanálaholið eru alltaf fókusaðir á sama punktinn, þannig að flúrljómun sem örvað er utan fókusplansins kemst ekki inn í skynjunargatið.


Einfalda tjáningin á vinnureglunni um leysisfókussmásjá er að hún notar leysir sem ljósgjafa og bætir við leysiskönnunartæki og samtengdu fókustæki á grundvelli hefðbundinnar flúrljómunarsmásjármyndatöku. Það er kerfi sem er stjórnað af tölvu fyrir stafræna myndatöku og vinnslu.

 

4 Larger LCD digital microscope

Hringdu í okkur