Laser confocal smásjá Eiginleikar og forrit
Þó að í venjulegri smásjá sé myndflöt athugunarinnar einangruð frá aðliggjandi ásflötum með því að skarast brenniplan hlutlinsunnar við skynjarann, er þessi einangrun í samfókussmásjá náð með því að lýsa upp sýnið með sveiflutakmörkuðum punkti á ljós og síun flökkuljóss með því að nota nælugat í leið safnaðs ljóss við samtengda fókus þessa ljóspunkts til að ná þessari einangrun og bæta þannig upplausn.
Aðeins ljósið sem endurkastast til baka frá samtengdu sýnislaginu getur farið í gegnum pinhole í söfnunarljóssleiðinni, en restin af óviðkomandi endurkasti sýnislagsins er lokað af pinhole. Þetta gefur verulega aukningu á upplausn. Sýnd hér að neðan er samanburður hlið við hlið á fjölvíddar flúrljómunarsmásjárskoðun og confocal smásjá á sama þykka sýninu. Þegar röð mynda er tekin á mismunandi brennivítum, er mynd sem almennt er kölluð „z-stafla“ framleidd, sem sýnir upplausnina og birtuskilaaukann sem framleiðsla á samfókus smásjá og undirliggjandi ástæður fyrir þessum ávinningi. Það má sjá að þegar myndin er skoðuð efst á staflanum þar sem myndavélin er fyrir ofan vefinn kemur í ljós mikið magn af dreifðu ljósi í flúrljómunarmyndinni, en samfókus smásjámyndin virðist svört. Þessi lækkun á PSF í axial átt stuðlar beint að mismun á upplausn sem sést við sjónsviðmótið í miðju z-stafla.
Optísk sneiðskönnun
Annar eiginleiki við leysiskönnun confocal smásjárskoðun er að það er skönnun myndgreiningartækni. Hefðbundin breiðsviðslýsingartækni lýsir upp allt sýnishornið þannig að hægt er að taka myndina beint með berum augum eða skynjara, en LSCM notar einn eða fleiri fókusljósgeisla til að skanna í gegnum sýnið, þannig að myndin sem myndast er kölluð sjónræn sneið, eins og sýnt er á eftirfarandi skýringarmynd. Munurinn á hefðbundinni breiðsviðslýsingu og leysiskönnun confocal lýsingu er sýndur hér að neðan.
Þess vegna er hagnýt leið nútíma confocal smásjárskoðun sýnd á myndinni hér að neðan. Örvunarljósið frá leysinum er leitt í gegnum tvíhliða spegil og skannað í gegnum par af galvanometerspeglum í x-stefnu og y-stefnu sýnisins, og örvun (eða endurspeglun) sýnisins fer í gegnum pinhole inn í PMT. skynjari sem á að taka upp og skráða skannaða myndin er endurgerð af tölvu til að framleiða raunverulega mynd af sýninu.
