PH mælir - Ákvörðun og aðlögun á meðal pH
Allar örverur verða fyrir áhrifum af pH-gildi umhverfisins sem þær búa í. Oft þrengir tilvist sértækra tegunda pH-sviðið sem þær vaxa í. Stundum getur sýrustig eða basastig miðilsins einnig virkað sem vaxtarvalsþáttur. Fyrir lífefnafræðilega prófunarmiðla er pH-sviðið þar sem örverur sýna tk-virkni í undirlaginu hins vegar þrengra en pH-bilið sem þarf til vaxtar: því er mikilvægt að stilla pH miðilsins að því marki sem búist er við. Þegar rannsóknarstofan undirbýr efnið í samræmi við samsetningu miðilsins verður að athuga pH og stilla það. Það verður að benda á að jafnvel fyrir tilbúna tilbúna tilbúna þurrkaðan miðilinn sem framleiðandi lætur í té (sérstaklega fyrir suma þurrkaðan stofn), þarf að mæla endanlegt pH eftir að tilraunaefnið er búið til.
Nákvæmasta leiðin til að mæla pH miðils er með pH-mæli. Fyrir notkun verður að kvarða það með staðlaðri jafnalausn með þekktu pH (venjulega er pH 4 til 7). Skolaðu rafskaut pH-mælisins með eimuðu vatni og dýfðu því í ræktunarmiðilinn í bikarglasinu og lestu síðan pH ræktunarmiðilsins af kvarða pH-mælisins. Hver framleiðandi gefur nákvæmar notkunarleiðbeiningar fyrir hverja tegund pH-mælis.
Þegar ræktunarmiðillinn er útbúinn er auðvelt að stilla PH með því að nota pH-mæli með vélrænni hræringu. Ræktunarmiðillinn skal útbúinn í íláti (svo sem stórum bikarglasi) sem hægt er að hræra stöðugt í. eða Teflon-vafinn seglum. Stilla þarf sýrustig miðilsins sem inniheldur agar eftir þíðingu, sem er auðveldlega gert með hitahæfum segulhræru. Þegar pH er stillt skal nota staðlaða jafnalausn með þekktu pH til að kvarða pH mælinn fyrst. Settu síðan samsetta rafskautið og viðnámshitamælirinn (ef einhver er) í miðilinn, bættu hægt við viðeigandi magni af saltsýru og natríumhýdroxíði frá enda bikarglassins í burtu frá rafskautinu, svo að miðillinn nái og viðhaldi nauðsynlegu pH.
Hitajöfnun pH-mælisins ætti að taka tillit til áhrifa hitastigs á rafskautskerfið: í sumum þynningum og miðlum breytist pH talsvert með hitastigi. Fyrir fljótandi miðla og þynningar er venjulega hægt að stilla pH og mæla annað hvort við 25 gráður eða við hitastigið sem þeir eru notaðir við.
Stilla verður sýrustig agarmiðilsins eftir að það hefur verið leyst upp og hitastig leysisins er yfir 45 gráður: þess vegna ætti að ákvarða sýrustig fasta miðilsins við notkunshitastig hans. Á þessum tíma ætti að nota samsett rafskaut með flathaus og hitastigsuppbót pH-mælisins ætti að vera handvirkt. Þegar ræktunarmiðillinn er útbúinn, ef það er ákvarðað að sýrustig ræktunarmiðilsins sé mismunandi á milli bræðsluástands og storknunarástands, þýðir það að það er villa við að stilla pH.
Sömuleiðis, þegar tilbúinn miðillinn er hitasótthreinsaður (td autoclaved), getur það einnig gengist undir pH breytingar. Fyrir þurrkaðan miðilinn hefur framleiðandinn tekið tillit til þess og venjulega er engin þörf á að stilla pH heldur skal athuga vandlega pH miðilsins sem á að nota. Ef stilla þarf pH á þurrkaða agarmiðlinum við endurupplausn eða undirbúning, er best að stilla það með síusótthreinsðri saltsýru og natríumhýdroxíðlausn eftir dauðhreinsunarskrefið til að forðast ofhitnun miðilsins. Þegar miðill er útbúinn með mismunandi hráefnum eða lyfjum verður að athuga pH miðilsins eftir autoclave. Að auki, ef sýrustig miðilsins virðist breytast það sama eftir hverja sjálfkrafa, er hægt að stilla sýrustigið á viðeigandi hátt þegar efnið er útbúið. Hins vegar er enn nauðsynlegt að ákvarða loka pH miðilsins eftir dauðhreinsun.
