Meginreglur Laser Confocal Microscopy (LSCM)
Laser confocal smásjá notar lýsingarpinhole sem er staðsett fyrir aftan ljósgjafann og skynjunarpinhole sett fyrir framan skynjarann til að ná fram punktalýsingu og punktskynjun. Ljós frá ljósgjafanum er fókusrað á punkt í brenniplani sýnisins með ljósi sem er sent frá lýsingarpinnagatinu og flúrljómun sem gefin er út frá þeim punkti er mynduð innan greiningarpingatsins og allt ljós sem gefur frá sér utan þess punkts er lokað af uppgötvun pinhole. Lýsingarpinnagatið og greiningarpingatið eru samtengd fyrir upplýsta eða greinda punktinn, þannig að greindi punkturinn er samtengingarpunktur og planið þar sem greindi punkturinn er staðsettur er confocal planið. Tölvan sýnir punktinn sem fannst á tölvuskjánum í formi myndpunkts. Til þess að framleiða heila mynd skannar skannakerfi í sjónbrautinni yfir brenniplan sýnisins og framleiðir þannig heildarmynd. Svo lengi sem burðarstigið er fært upp og niður meðfram Z-ásnum, er nýtt stig sýnisins fært yfir á confocal planið og nýja stigi sýnisins er myndað á skjánum, þegar Z-ásinn heldur áfram að hreyfa, myndast ljósskurðarmyndir af mismunandi stigum sýnisins.
Hin hefðbundna sjónsmásjá notar sviðsljósgjafa, mynd hvers punkts á sýninu verður fyrir áhrifum af dreifingu eða dreifingu ljóss frá nálægum punktum; leysirskönnun confocal smásjá notar leysigeisla í gegnum upplýsta pinhole til að mynda punktljósgjafa á sýninu sem er skannað á hverjum punkti innra brenniplans, sýnishornið á geislapunktinum, myndgreiningu af greiningarpinhole, með því að greina pinhole. eftir ljósmargföldunarrör (PMT) eða kalt raftengt tæki (cCCD) Móttekin punkt fyrir punkt eða línu fyrir línu myndast fljótt flúrljómandi mynd á tölvuskjánum. Lýsing pinhole og uppgötvun pinhole miðað við brenniplan hlutlinsunnar er samtengd, punkturinn á brenniplaninu á sama tíma einbeittur að lýsingu pinhole og losun pinhole, punkturinn utan brenniplansins mun ekki vera í uppgötvun pinhole við myndatöku, þannig að confocal myndin sem fæst er sjónræn þversnið sýnisins, sem sigrast á göllum venjulegrar smásjámyndar óskýrrar.
Frá grunnreglunni, leysir confocal smásjá er nútíma sjón smásjá, það er venjuleg ljós smásjá frá tækni til að gera eftirfarandi endurbætur.
1. Notaðu leysir sem ljósgjafa vegna þess að einlita leysirinn er mjög góður, bylgjulengd ljósgjafageislans er sú sama, í grundvallaratriðum útrýma litaskekkjunni.
2. Notkun confocal tækni í brenniplaninu á hlutlinsunni sem er sett í miðjuna með litlu gati í skífunni, brenniplanið fyrir utan villuljósið sem hindrar, útrýmir kúlulaga frávikinu; og útrýma enn frekar litfrávikum.
3. Laser confocal smásjá sem notar punktskönnunartækni til að sundra sýninu í tvívítt eða þrívítt rými í óteljandi punkta, með mjög litlum leysigeisla (punktljósgjafa) punkt fyrir punkt, línu fyrir línu skanna myndatöku, og síðan í gegnum örtölvusamsetning heils plans eða þrívíddar myndar. Hin hefðbundna ljóssmásjá er sviðsljósgjafi undir einu sinni myndgreiningu, sýni á hverjum punkti myndarinnar verða við hliðina á dreifðu ljósi og dreifðri ljóstruflunum. Það er ekki hægt að bera saman skýrleika og nákvæmni þessara tveggja mynda.
4. Öflun og úrvinnsla ljósmerkja með tölvu og mögnun merkjanna með ljósmargfaldarröri
Í laser confocal smásjánni kemur tölvan í stað mannsauga eða myndavélar fyrir athugun og myndbandsupptöku og myndirnar sem fást eru stafrænar og hægt er að vinna þær í tölvunni til að bæta skýrleika myndanna aftur. Þar að auki getur notkun ljósmargfaldarröra magnað mjög veik merki, sem bætir næmið til muna. Sem afleiðing af samsettri notkun ofangreindrar tækni má segja að LSCM sé fullkomnasta smásjá í heimi. Það má segja að LSCM sé samsetning smásjáframleiðslutækni, ljósatækni, tölvutækni **, er óumflýjanleg vara þróunar nútímatækni.
