Kröfur um gerð venjubundinna sýna fyrir smásjárskoðun
Confocal smásjá er tímamótandi hátækni ný vara þróuð á níunda áratugnum og er eitt mikilvægasta greiningartæki í sameindalíffræði og lífvísindum í dag. Confocal smásjárskoðun byggir á flúrljómunarsmásjá myndgreiningu með leysiskönnunartæki bætt við, með tölvu til myndvinnslu til að ná flúrljómandi myndum af örbyggingu inni í frumum eða vefjum, og til að fylgjast með breytingum á formgerð margra lífeðlisfræðilegra merkjavéla á undirfrumustigi. Vertu öflugt rannsóknartæki á sviði formfræði, sameindafrumulíffræði, taugavísinda, lyfjafræði, erfðafræði og annarra vísindasviða.
Sýnaundirbúningur fyrir confocal smásjárskoðun er mikilvægt skref fyrir greiningu. Sýni þurfa að vera merkt með flúrljómun (einn, tvöfaldur, þrefaldur).
hið
Sýni geta verið fastir eða lifandi vefir, eða fastir eða lifandi viðloðandi ræktanir. Frumur ættu að vera ræktaðar á Confocal sérstökum smáræktunardiskum eða hyljara. Fleygðu frumum, hristu eða slepptu sneiðum og hyldu með hlífðarfilmu. Zda þykkt sýnisins er um það bil 1~2 mm, þykkt hlífðarglersins sem notað er ætti að vera minni en 0,17 mm og þykktin á glerinu ætti að vera á milli 0.8~1,2 mm, og yfirborðið er slétt, þykktin er einsleit og það er engin augljós truflunarflúrljómun. Festingarmiðill er oft notaður fyrir föst sýni og glýseról framleitt í PBS með pH 8.5-9 er almennt notað til uppsetningar.
Venjulegar kröfur um undirbúning sýna:
1. Val á litarefnum
Þar sem confocal smásjáin notar einnar bylgjulengdar leysir sem ljósgjafa, ætti val á flúrljómandi litarefnum að byggjast á bylgjulengd leysisins sem er búinn confocal smásjánni. Ef það eru mörg flúrljómandi litarefni í sama sýninu ætti einnig að huga að losunarbylgjulengd þeirra eins og hægt er. Ekki skarast til að forðast krosslitavandamál.
2. Val á sýnishorni
Almennt er aflmikil hlutlinsa ruðningssmásjár olíulinsa, töluljósop hennar er lítið og vinnslufjarlægðin milli linsunnar og sýnisins þarf að vera ekki meira en 0.17 mm. Rennur og hyljarar eru í lagi. Ef um er að ræða sviffrumur eða svifagnir, er hægt að nota petrí-skál sem er tileinkaður confocal smásjá til að bera sýnið til athugunar.
3. Val á festingarmiðli
Ef aðeins þarf að fylgjast með sýninu einu sinni og flúrljómunin er ekki auðvelt að slökkva, getur þú valið ákveðinn styrk af glýserólblöndu til að innsigla glæruna. Ef setja þarf sýnið í nokkurn tíma og taka það mörgum sinnum, ætti að velja uppsetningarmiðil til að slökkva gegn flúrljómun til að draga úr tapi flúrljómunarmerkja.
