Stereo Fluorescence Microscope Notkun og varúðarráðstafanir
Leiðbeiningar:
(1) Settu efnisblaðið á sviðið.
(2) Kveiktu á spennujafnara flúrljómunarsmásjáarinnar. Ýttu síðan á starthópinn til að kveikja á UV lampanum og slökktu ekki á honum innan 15 mínútna og ekki ræstu hann aftur innan 3 mínútna eftir að hann er slökktur.
(3) Snúðu örvunarsíunni á v, litaaðskilnaðarsíuna á v, og veldu 495 eða 475nm lokunarsíu.
(4) Veldu uvFL40, uvFL100 flúrljómandi hlutlæga smásjá fyrir smásjárskoðun.
(5) Bætið flúrljómandi olíu á glæruna, notaðu fyrst 40 x og notaðu síðan 100 x fókussmásjá til að athuga. Flúrljómun kemur fram.
(7) Þar sem flúrljómun flúrljómandi efna veikist smám saman með tímanum þegar þau eru geisluð með útfjólubláu ljósi, ætti að breyta sjónsviðinu oft við smásjárskoðun.
(8) Einnig er hægt að nota uvFL10 eða uvFL20 litla stækkunarsmásjár til að skoða efni (engri flúrljómandi olíu er bætt við þegar linsur með litlum krafti eru notaðar).
Upptökuaðferð flúrljómunarmyndar:
Flúrljómunarmyndin sem flúrljómunarsmásjáin sérð hefur bæði formfræðilega eiginleika og flúrljómunarlit og birtustig. Þegar niðurstöður eru dæmdar þarf að sameina þetta tvennt til að fá alhliða mat. Niðurstöðurnar eru skráðar út frá huglægum vísbendingum, það er sjónræn athugun starfsmanna. Sem almenn eigindleg athugun, í grundvallaratriðum áreiðanleg. Með þróun tækni og vísinda eru hlutlægar vísbendingar notaðar til að skrá niðurstöður dóma í mismiklum mæli, svo sem frumulófsmælir, myndgreiningartæki og önnur tæki. Hins vegar verður einnig að sameina niðurstöðurnar sem skráðar eru með þessum tækjum og huglægum matum.
Flúrljómunarsmásjá ljósmyndun er mjög nauðsynleg til að taka upp flúrljómunarmyndir. Þar sem auðvelt er að hverfa og veikja flúrljómun er nauðsynlegt að skrá niðurstöðurnar í rauntíma. Aðferðin er í grundvallaratriðum sú sama og í venjulegri örmyndatöku. Þarf bara að nota háhraða ljósnæma filmu eins og ASA200 eða hærri eða 24. ofar. Vegna þess að útfjólublátt ljós hefur mikil áhrif á slökkvun flúrljómunar, eins og FITC merki, mun flúrljómun birta minnka um 50 prósent þegar það er geislað með útfjólubláu ljósi í 30s. Þess vegna, ef lýsingarhraði er of hægur, er ekki hægt að taka flúrljómandi myndina. Almennar flúrljómunarsmásjár til rannsókna eru með hálfsjálfvirkum eða fullsjálfvirkum ljóssmásjárkerfum.
Varúðarráðstafanir:
(1) Starfið nákvæmlega í samræmi við kröfur flúrljómunarsmásjár verksmiðjuleiðbeininganna og breytið ekki forritinu að vild.
(2) Skoðun ætti að fara fram í dimmu herbergi. Eftir að komið er inn í myrkraherbergið skaltu tengja aflgjafann og kveikja á ofurháþrýstings kvikasilfurslampanum í 5-15 mínútur. Eftir að sterka ljósið frá ljósgjafanum er stöðugt aðlagast augun algjörlega að myrkraherberginu og byrja síðan að fylgjast með sýninu.
(3) Til að koma í veg fyrir að útfjólubláir geislar skaði augun ætti að nota hlífðargleraugu þegar ljósgjafinn er stilltur.
(4) Skoðunartíminn er helst 1-2 klukkustundir í hvert sinn. Ef það fer yfir 90 mínútur mun ljósstyrkur kvikasilfurslampans með ofurháþrýstingi minnka smám saman og flúrljómunin veikist; eftir að sýnið hefur verið geislað með útfjólubláum geislum í 3-5 mínútur mun flúrljómunin einnig veikjast verulega; því ætti það ekki að fara yfir 2-2 klukkustundir að hámarki. 3 klst.
(5) Líftími ljósgjafar flúrljómunarsmásjáarinnar er takmarkaður og sýnin ættu að vera skoðuð sameiginlega til að spara tíma og vernda ljósgjafann. Þegar heitt er í veðri ætti að bæta við viftum til að dreifa hitanum og skrá nýju perurnar frá upphafi notkunartíma þeirra. Þegar þú vilt nota hann aftur eftir að lampinn er slökktur verður þú að bíða þar til peran er nægilega kæld áður en þú kveikir á honum. Forðastu að kveikja á ljósgjafanum nokkrum sinnum á dag.
(6) Fylgstu með sýninu strax eftir litun, þar sem flúrljómunin veikist smám saman með tímanum. Ef sýnishornið er geymt í pólýetýlenplastpoka við 4 gráður getur flúrljómunarveikingartímanum verið seinkað og komið í veg fyrir að uppsetningarefnið gufi upp.
(7) Dómstaðall um birtustig flúrljómunar: honum er almennt skipt í fjögur stig, það er "eitt" - engin eða veik flúrljómun sést. " plús "—Aðeins vel sjáanlegt flúrljómun sést. " plús plús "—Sýnilegt og bjart
