Munurinn á laser confocal smásjá og hefðbundinni sjón smásjá
Laser Scanning Confocal Fluorescence Microscopy er tiltölulega háþróað sameinda- og frumulíffræðigreiningartæki sem notar tölvu-, leysi- og myndvinnslutækni til að fá þrívíddargögn úr lífsýnum. Það er aðallega notað til að fylgjast með uppbyggingu lifandi frumna og líffræðilegum breytingum á tilteknum sameindum og jónum, magngreiningu og magngreiningu í rauntíma.
Meginreglan um leysir confocal smásjárskoðun: Notaðu lýsingarpinnagatið sem er staðsett fyrir aftan ljósgjafann og greiningarpingatið sem er sett fyrir framan skynjarann til að átta sig á punktalýsingu og punktskynjun. Ljósið sem er sent frá ljósgjafanum í gegnum lýsingarpinnagatið er fókusað á punkt á brenniplani sýnisins og flúrljómunin sem gefin er frá þessum punkti er mynduð á skynjunargatinu og allt ljós sem gefur frá sér utan þessa punkts er læst með uppgötvuninni. pinhole. Lýsingarpinnagatið og greiningarpingatið eru samtengd geislapunktinum eða greinda punktinum, þannig að sá punktur sem greindur er er confocal punkturinn og planið þar sem greindi punkturinn er staðsettur er confocal planið.
Tölvan sýnir punkta sem greindust á tölvuskjánum í formi myndpunkta. Til þess að búa til fullkomna mynd skannar skannakerfið í sjónbrautinni á brenniplan sýnisins til að búa til fullkomna confocal mynd. Svo lengi sem sviðið færist upp og niður meðfram Z-ásnum, er nýtt lag af sýninu fært yfir á confocal planið og nýja lagið af sýninu er myndað á skjánum. Með stöðugri hreyfingu Z-ássins er hægt að fá samfelldar myndir af mismunandi lögum sýnisins. Ljós skorin mynd.
Munurinn á hefðbundnum ljóssmásjáum
Hefðbundnar flúrljómunarsmásjár hafa óyfirstíganlegan galla: flúrljómandi mannvirki fyrir utan brenniplanið eru óskýr og óskýr. Ástæðan er sú að flest líffræðileg sýni hafa skarast. Ef flúrljómunarmerktu mannvirkin eru dreifð á mismunandi stigum og skarast, er dreifð flúrljómun ofan frá eða neðan brenniplansins einnig móttekin af hlutlinsunni og upplausn flúrljómunarsmásjáarinnar mun batna til muna. draga úr.
Á grundvelli hefðbundinna ljóssmásjáa, nota leysisskönnun confocal smásjár leysirljós sem ljósgjafa, samþykkja meginregluna og tækið um samtengda fókus og nota tölvur til að framkvæma stafræna myndvinnslu, athugun, greiningu og úttak á hlutunum sem skoðaðir eru. Hægt er að skanna sýnishornið og mynda sýnishornið til óeyðandi athugunar og greiningar á þrívíða staðbundinni uppbyggingu frumna. Á sama tíma, með því að nota ónæmisflúrljómandi merkingar og jónaflúrljómandi merkingarrannsóknir, getur þessi tækni ekki aðeins fylgst með föstum frumum og vefjahlutum, heldur einnig framkvæmt rauntíma kraftmikla athugun og greiningu á uppbyggingu, sameindum, jónum og lífsvirkni lifandi frumna, á undirfrumustigi Að fylgjast með lífeðlisfræðilegum merkjum eins og Ca2 plús , pH-gildi, himnugetu og breytingum á frumuformi hefur orðið ný kynslóð öflugra rannsóknartækja á sviði formfræði, sameindafrumulíffræði, taugavísinda, lyfjafræði og erfðafræði.
