Til að fylgjast með bakteríum, hvaða tegund af smásjá ætti ég að nota?
Sem nákvæmnistæki til að stækka og skoða hluti, geta sjónsmásjár fylgst með mismunandi gerðum sýna. Notendur í atvinnugreinum eins og örverurannsóknum, plönturannsóknum, dýrarannsóknum o.fl. þurfa að sjá stærð baktería. Því hvers konar smásjá ætti að nota þegar slík sýni eru skoðuð? Þessi grein veitir ítarlega greiningu.
Svarið við þessari spurningu er hægt að ræða út frá hliðum bakteríufrumustærðar, mannsauga og upplausnar smásjár.
1. Stærð bakteríufrumna er yfirleitt á míkrómetrabilinu, tekið Escherichia coli sem dæmi: lengdin er um 1um og breiddin er um 0.5um.
2. Upplausn vísar til minnstu fjarlægðar milli tveggja hluta sem greinilega er hægt að greina á milli.
Upplausn smásjáar vísar til lágmarksfjarlægðar milli tveggja hluta sem hægt er að greina greinilega á milli eftir að smásjáin stækkar myndina.
Upplausn mælitækis vísar til getu þess til að veita upplýsingar um örbyggingu hlutarins sem verið er að mæla. Því hærri sem upplausnin er, því ítarlegri eru upplýsingarnar. Að fara yfir mögnunarmörkin er kallað óvirk mögnun, sem getur ekki veitt frekari upplýsingar um fíngerða uppbyggingu.
3. Upplausn mannsauga er 0.1mm, sem þýðir að við nægilega lýsingu og 1 feta fjarlægð er minnsta fjarlægðin sem mannsaugað getur greint á milli tveggja punkta 0.1mm .
4. Í stuttu máli, til að sjá tilvist baktería, verður stækkunin að vera að minnsta kosti 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 sinnum. Hins vegar, við þessa stækkun, eru bakteríurnar (Escherichia coli) sem sjást aðeins litlir punktar og til að sjá nákvæmari upplýsingar um byggingu er nauðsynlegt að auka stækkun smásjáarinnar.
5. Upplausn venjulegra ljóssmásjáa er takmörkuð af bylgjulengd sýnilegs ljóss (390-770nm), og fer yfirleitt ekki yfir 1000 sinnum, sem er hámarksstækkun venjulegra ljóssmásjáa. Stækkun yfir 1000 sinnum getur ekki veitt fínni upplýsingar um uppbyggingu og fellur undir gildislausa mögnun.
6. Stækkun rafeindasmásjár getur náð 800.000 sinnum, og grundvallarregla hennar er sú sama og venjulegrar sjónsmásjár, sem myndar stuttar bylgjulengdar rafeindabylgjur í gegnum háspennu.
Með því að þysja inn 400 sinnum (10x, 40x) sérðu varla bakteríurnar, en þær eru aðeins á stærð við nálarodd, eins og litlir punktar. Við stækkum venjulega 1000 sinnum (10x, 100x) til að fylgjast með og á þessum tíma má enn sjá útlit bakteríana nokkuð greinilega. Eftir sérstaka litun sést flagellan einnig vel. Til að stækka 1000 sinnum þarftu að nota stækkunargler. Olíuspegillinn svokallaði á að láta dropa af tjöru falla á milli linsunnar og hlífðarglersins. Brotstuðull tjöru er hærri en lofts, þannig að hægt er að nota stærri stækkun.
10x og 40x gefa til kynna að þessi linsa sé stækkuð 10x og 40x. Stækkun augnglersins margfölduð með stækkun hlutlinsunnar gefur heildarstækkun smásjáarinnar. Hægt er að skipta um augngler og hlut smásjár sem notuð var í miðskóla og er augnglerið venjulega 5x eða 10x. Augnglerið í lítilli smásjá er venjulega aðeins 10x, sem hægt er að nota til að fylgjast með Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis og Bacillus subtilis (notað til að fylgjast með gróum).
