Hvers konar smásjá er notuð til að sjá lögun örverufrumna
Samheiti yfir allar örsmáar lífverur sem erfitt er fyrir einstaklinga að fylgjast með með berum augum. Örverur eru meðal annars bakteríur, vírusar, sveppir og nokkrir þörungar. (Sumar örverur eru hins vegar sýnilegar með berum augum, svo sem sveppir sem tilheyra sveppum, Ganoderma lucidum o.s.frv.) Veirur eru tegund „ófrumulífvera“ sem samanstanda af nokkrum þáttum eins og kjarnsýrum og próteinum, en þeirra lifun verður að vera háð lifandi frumum. Samkvæmt mismunandi umhverfi sem er til staðar er hægt að skipta þeim í dreifkjörnungaörverur, geimörverur, sveppaörverur, gerörverur, sjávarörverur o.s.frv.
Hlutverk og skaði örvera:
Eitt mikilvægasta áhrif örvera á menn er algengi smitsjúkdóma. 50 prósent sjúkdóma í mönnum eru af völdum veira. Saga örvera sem valda sjúkdómum í mönnum er saga stöðugrar baráttu manna við þær. Mannskepnan hefur náð miklum framförum í forvörnum og meðhöndlun sjúkdóma, en nýjar og endurkomnar örverusýkingar halda áfram að koma fram, svo sem mikill fjöldi veirusjúkdóma sem skortir árangursrík lækningalyf. Sjúkdómsvaldandi verkun sumra sjúkdóma er ekki ljós. Misnotkun á miklum fjölda breiðvirkra sýklalyfja hefur valdið miklum valþrýstingi sem hefur valdið því að margir stofnar stökkbreytast, sem leiðir til þess að lyfjaónæmi kemur upp og heilsu manna er ógnað af nýjum ógnum. Sumar aðgreindar vírusar geta stökkbreyst með endurröðun eða endurflokkun. Dæmigerðasta dæmið er inflúensuveira.
Eftir að hafa þekkt sérstaka skilgreiningu á örverum, hvaða tegund af smásjá ætti tilraunamaðurinn að nota þegar hann rannsakar örverur til að sjá og hvaða smásjá er hægt að nota til að sjá betur og til að skoða og greina algengar örveruform.
Uppfinningin með smásjánni er að geta séð brosandi hluti sem ekki sjást með berum augum. Stærð örvera er mjög lítil og því þarf að stækka þær og fylgjast með þeim með hjálp smásjár. Að auki eru til margar tegundir af örverum, þannig að í grundvallaratriðum geta flestar sjónsmásjár Til að fylgjast með örverum er næsta spurning hvaða tegund af smásjá ætti að nota til að athuga og greina örverur. Algengar smásjár fyrir athugun á formgerð örvera eru meðal annars líffræðilegar smásjár, fasasmásjár, öfugar smásjár, flúrljómunarsmásjár og confocal smásjár. Smásjá og svo framvegis.
Eftirfarandi lýsir hinum ýmsu smásjám sem notuð eru til að fylgjast með örverum:
1. Venjuleg ljóssmásjá
Náttúrulegt ljós eða ljós er notað sem ljósgjafi og er bylgjulengd þess um {{0}},4 μm. Upplausn smásjáarinnar er helmingur af bylgjulengdinni, það er 0,2 μm, og minnsta myndin sem sést með berum augum er 0,2 mm. Þess vegna getur það stækkað 0,2μm agnirnar í 0,2mm sem sjást með berum augum með því að nota olíuspegil til að stækka 1000 sinnum. Hægt er að nota venjulegar sjónsmásjár til að fylgjast með bakteríum, bakteríum og sveppum.
2. Darkfield smásjárskoðun er almennt notuð til að fylgjast með formgerð og hreyfingu ólitaðra örvera. Eftir að dökksviðsþéttirinn er settur upp í venjulegri smásjá getur ljósið ekki farið beint frá miðjunni og sjónsviðið er dökkt. Þegar sýnishornið fær skáljóst frá brún eimsvalans getur það dreift sér, þannig að hægt er að sjá bjartar örverur í dökkum sviðsbakgrunni eins og bakteríur eða spirochetes.
3. Fasa andstæða smásjá Fasa andstæða smásjá notar ljósáhrif fasa mismunaplötunnar til að breyta ljósfasa og amplitude beins ljóss og umbreyta mismun ljósfasa í ljósstyrksmun. Undir fasa-andstæða smásjá, þegar ljós fer í gegnum ólitað sýni, stafar munurinn á ljósfasa af ósamræmi í þéttleika mismunandi hluta sýnisins og hægt er að sjá formgerð, innri uppbyggingu og hreyfiham örvera.
4. Flúrljómunarsmásjá Flúrljómunarsmásjá er í grundvallaratriðum það sama og venjuleg sjónsmásjá, aðalmunurinn er ljósgjafinn, sían og eimsvalinn. Sem stendur nota flestir þeirra epi-ljós tæki og háþrýsti kvikasilfurslampar eru almennt notaðir sem ljósgjafar sem geta gefið frá sér útfjólubláu eða bláfjólubláu ljósi. Það eru tvær tegundir af síum: örvunarsíu og frásogssíu. Auk almennra bjartsviðsþétta er einnig hægt að nota dökksviðsþéttara í flúrljómunarsmásjám sem nota blátt ljós til að auka andstæðan milli flúrljómunar og bakgrunns. Þessi aðferð á við til að greina eða bera kennsl á bakteríur litaðar með flúrljómandi litarefnum eða samsettar með flúrljómandi mótefnum.
5. Rafeindasmásjár nota rafeindaflæði sem ljósgjafa. Í samanburði við sýnilegt ljós er bylgjulengdin tugþúsundfalt mismunandi, sem bætir upplausnina til muna. Segulspólan er notuð sem ljósmögnunarkerfi og stækkunin getur náð tugþúsundum eða hundruð þúsunda sinnum. Það er oft notað í veiruagnir. og athugun á uppbyggingu baktería.
Athugun á ólituðum örverusýnum:
Almennt er hægt að nota ólituð sýni til að fylgjast með formgerð, krafti og hreyfingu baktería. Bakteríur eru litlausar og gagnsæjar þegar þær eru ólitaðar og sjást í smásjá aðallega af mismun á brotstuðul baktería og umhverfisins í kring. Bakteríur með flagella hreyfast kröftuglega á meðan bakteríur án flagella sýna óreglulega Brownian hreyfingu. Lífvænlegar bakteríur eins og Treponema pallidum, Leptospira og Campylobacter hafa sérstakt form og hreyfimynstur sem hafa greiningarmikilvægi. Algengar aðferðir eru þrýstingsfallsaðferð, pendant drop aðferð og háræðaaðferð.
1. Hangandi dropaaðferð Berið vaselín í kringum íhvolfa gatið á hreinu íhvolfu glerrennibrautinni, taktu hring af bakteríusviflausn með sáningarlykkju og settu hann í miðju hlífðarglersins, stilltu síðan íhvolfa gatið á íhvolfu glerrennunni við dropinn í miðju hlífðarglersins og settu hlífina á, snúðu henni svo hratt við, ýttu létt á hlífðarmiðann til að láta hann festast þétt við vaselínið á brún íhvolfu gatsins og fylgstu síðan með undir miklum krafti smásjá (eða dökkt svið).
2. Taktu hring af bakteríusviflausn með sáningarlykkju og settu hann í miðjuna á hreinni glerrennibraut með þrýstifallsaðferð og hyldu bakteríusviflausnina varlega með hlífðargleri, gæta þess að forðast myndun loftbóla og koma í veg fyrir bakteríusviflausnin frá því að flæða yfir. Brightfield (eða darkfield) athugun undir sterkri linsu.
3. Háræðaaðferðin er aðallega notuð til að kanna hreyfihvörf loftfirrtra baktería. Veldu venjulega 60~70mm langa. Eftir að sviflausn loftfirrtra bakteríanna hefur verið dregin í gegnum háræð með 0,5-1,0 mm opi, lokaðu tveimur endum háræðsins með loga. Háræðið var fest á glerrennuna með plastpappír og skoðað undir sterkri linsu í dimmu sviði.
Athugun á lituðum örverusýnum með smásjá:
Eftir að bakteríusýnin hafa verið lituð, vegna mikillar andstæðu í lit milli bakteríanna og umhverfisins í kring, geta formfræðilegir eiginleikar bakteríanna (svo sem stærð, lögun, fyrirkomulag osfrv.) bakteríanna og sumra sérstakra mannvirkja verið lituð. sést greinilega undir venjulegri sjónsmásjá (svo sem hylkjum, flagella, gró o.s.frv.), og hægt er að flokka og greina bakteríurnar í samræmi við litunarviðbragðið.
(1) Almenn aðferð við bakteríulitun Almenn aðferð við bakteríulitun er: strok (þurrkun) - festing - litun.
1. Strok Undirbúningur á blóði, seyti, útskilnaði, stunguvökva og vökvaræktun, og bein þunnfilmustrok á glerglas; krufningu eða sýktum dýravef, strjúkið meininu með bómullarþurrku til sýnatöku. Til að búa til bakteríuþyrpingar eða grasflöt á föstu formi skaltu fyrst nota sáningarlykkju til að taka hring af venjulegu saltvatni og setja hann í miðjuna á rennibrautinni, nota síðan dauðhreinsaða sáningarlykkju til að taka lítið magn af ræktun og mala hana jafnt í venjulegu saltvatni og dreifðu því á 1cm2 Stóra eða litla málaða fleti, láttu það þorna náttúrulega við stofuhita eða þorna hægt í fjarlægð.
2. Tilgangur festingar er að drepa bakteríur, storkna bakteríuprótein og uppbyggingu og auðvelda litun; stuðla að því að bakteríur festist við rennibrautina til að forðast að skolast í burtu með vatni meðan á þvotti stendur; breyta gegndræpi baktería í litarefni, sem er gagnlegt fyrir uppbyggingu bakteríufrumna litunar. Það er venjulega fest með því að hita með loga og þurrkað strok er fljótt farið í gegnum logann í 3 sinnum. Það er betra að brenna ekki húðina á handarbakinu þegar hún snertir rennibrautina.
3. Litun Samkvæmt mismunandi skoðunartilgangi, veldu mismunandi litunaraðferðir til litunar. Þegar litað er skaltu bæta litarlausninni í dropatali til að auka þekjuna.
4. Mordant Sérhvert efni sem getur aukið sæknin milli litarefnisins og litaðs hlutarins, fest litarefnið á litaða hlutinn og valdið breytingu á gegndræpi frumuhimnunnar kallast beitingarefni. Algengt er að nota ál, tannínsýra, málmsölt og joð osfrv., og hitun er einnig notuð til að stuðla að litun. Hægt er að nota blettur á milli frumlitunar og mótlitunar og einnig er hægt að nota eftir festingu eða innihalda festingarefni og litun.
5. Aflitun Sérhver efnafræðileg efni sem getur fjarlægt lit litaða hlutarins er kallað aflitunarefni. Etanól, asetón o.s.frv. er almennt notað sem litarefni. Aflitunarefnið getur greint stöðugleika samsetningar baktería og litarefna, sem hægt er að nota til mismunandi litunar.
6. Mótlitunarbakteríur eða byggingar þeirra sem hafa verið aflitaðar eru oft mótlitaðar með mótlitunarlausn til að auðvelda athugun. Liturinn á mótlitunarlausninni er frábrugðinn litarlausninni til að mynda skarpa andstæðu. Mótlitunin ætti ekki að vera of sterk, til að hylja ekki litinn á upphafslituninni.
