Hvaða tegund af smásjá ætti að nota við bakteríuathugun
Ljóssmásjáin er mjög nákvæmt tæki til að sjá og stækka hluti. Mismunandi sjónsmásjár geta skoðað ýmsar sýnishorn. Notendur þurfa að geta séð magn bakteríustærðar á sviðum eins og örverurannsóknum, plönturannsóknum og dýrarannsóknum. Þessi grein skoðar ítarlega hvaða tegund af smásjá er best að nota þegar sýni eru flokkuð.
Stærð sýkla, skýra sjón manna, upplausn smásjár og fleiri þættir er hægt að nota til að svara þessari spurningu.
1. Bakteríufrumur hafa venjulega nokkrar míkron í þvermál. Íhugaðu stærð Escherichia coli, sem er um það bil 1 um að lengd og 0,5 um á breidd.
2. Upplausn er minnsta fjarlægðin þar sem hægt er að greina tvo hlutpunkta greinilega frá hvor öðrum.
Minnsta fjarlægðin milli tveggja hluta punkta sem hægt er að greina greinilega þegar smásjáin stækkar myndina er nefnd upplausn smásjáarinnar.
Upplausn tækisins lýsir getu þess til að veita upplýsingar um örbyggingu þess sem verið er að mæla. Upplýsingarnar sem gefnar eru eru ítarlegri eftir því sem upplausnin er hærri. Fyrir utan hámarksstækkunina er stækkunin kölluð ógild stækkun og ógild stækkun getur ekki leitt í ljós nákvæmari byggingarupplýsingar.
3. Minnsta fjarlægðin sem meðalauga getur greint á milli tveggja bletta er 0,1 mm, að því gefnu að það sé nóg ljós og að fjarlægðin sé meira en einn fet.
4. Að lokum verður stækkunin að vera að minnsta kosti: 0.1mm 0.5um=1000 5=200 sinnum til að greina tilvist sýkla. Hins vegar er bakterían (Escherichia coli) sem sést við þessa stækkun aðeins smá blettur. Stækkun smásjáarinnar verður að stilla til að sjá nákvæmari burðarvirki.
5. Sýnilega ljósrófið (390–770 nm), sem er hámarksgildi staðlaðrar ljóssmásjáastækkunar, takmarkar upplausn þessara tækja við venjulega ekki meira en 1000 sinnum. Stækkun meira en 1000 sinnum teljast ógildar stækkun og geta ekki boðið upp á fínni byggingarupplýsingar.
6. Rafeindasmásjáin hefur 800,000-falda stækkunargetu. Það vinnur á sömu grundvallarforsendum og venjuleg sjónsmásjá, sem er að nota háspennu til að framleiða skammbylgjulengdar rafeindabylgjur.
\Bakteríur sem eru bara á stærð við nálarodd og birtast sem smápunktar er varla hægt að greina þegar þær eru stækkaðar 400 sinnum (10x, 40x). Fyrir flestar athuganir höldum við áfram að stækka allt að 1000 sinnum (10x, 100x). Eins og er er enn hægt að sjá útlit bakteríunnar vel og með viðeigandi litun er enn hægt að sjá flagelluna greinilega. Þú þarft olíulinsu til að stækka 1000 sinnum. 'Olíuslinsan' krefst þess að setja dropa af sedrusviðolíu á milli hlífðarglersins og hlutlinsunnar. Þar sem sedrusviðolía hefur meiri ljósbrotsstuðul en loft er hægt að nota meiri stækkun.
10x og 40x gefa til kynna að linsan sé stækkuð 10 sinnum og 40 sinnum. Stækkun augnglersins er margfölduð með stækkun hlutarins til að fá heildarstækkun smásjáarinnar. Hægt er að skipta um augngler og hlutlinsur í smásjám sem notaðar eru í grunnskólum og eru augnglerin yfirleitt 5x og 10x. Augnglerið í lítilli smásjá er yfirleitt aðeins 10x og ég hef séð Escherichia coli (E.coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis og Bacillus megaterium (notað til að sjá gró).
