Kostir og gallar Multiphoton Laser Scanning Microscopy (MLSM)
Multiphoton leysir skönnun smásjá er tilraunaaðferð sem byggir á leysi skönnun smásjá tækni, sem veitir betri sjónskurðargetu fyrir þrívíddar athugun. Fjölljóseinda flúrljómunarörvunaraðferðin notar langbylgjulengd rautt ljós eða nær-innrautt ljós til að safna háupplausnar flúrljómunarmyndum af sýnum, sem veldur lágmarksskaða á lifandi sýnum. Þess vegna er það hentugur fyrir myndgreiningu á lifandi frumum, sérstaklega þykkum lifandi vefjum eins og heilasneiðum, fósturvísum osfrv. Myndrannsóknir á heilum líffærum eða jafnvel heilum líkama.
Kostirnir eru sem hér segir:
1. Notaðu rautt ljós eða innrautt ljós til að örva, og ljósdreifingin er lítil (dreifing lítilla agna er í öfugu hlutfalli við fjórða veldi bylgjulengdarinnar).
2. Engin pinhole er nauðsynleg og hægt er að safna fleiri dreifðum ljóseindum úr þversniði myndgreiningarinnar.
3. Pinhole getur ekki greint dreifðar ljóseindir sem eru sendar frá fókussvæðinu eða fókussvæðinu og merki/suðhlutfall fjölljóseinda mynda í djúpum lögum er gott.
4. Útfjólubláa eða sýnilega ljósið sem notað er til örvunar eins ljóseinda frásogast auðveldlega og dregur úr sýninu áður en geislinn nær brenniplaninu og erfitt er að örva djúp lög.
5. Að því er varðar líffræðilega smásjáathugun er fyrsta íhugunin að skemma ekki virkt ástand lífverunnar sjálfrar og viðhalda flæði vatns, jónastyrk, súrefni og næringarefni. Þegar um er að ræða ljósathugun verður bæði varmi og ljóseindaorka að vera innan þess geislunarmagns og ljósorku að frumurnar skemmist ekki.
6. Fjölljóseinda smásjá hefur einnig marga kosti. Til dæmis, hvað varðar þrívíddarupplausn, dýpt skarpskyggni, skilvirkni dreifingar, bakgrunnsljós, merki-til-suð hlutfall, stjórnun, osfrv., Það eru yfirgengileg einkenni sem fyrri leysismásjár höfðu ekki eða gátu ekki passað við.
Multi-photon confocal leysir skanna smásjá hefur verið útvíkkað til ýmissa rannsókna og notkunarsviða. Það getur framkvæmt þrívíddar óeyðandi athugun á sýnum í náttúrulegu ástandi og getur bætt upplausn og merki-til-suðhlutfall kerfisins. Notkun fjölljóseinda örvunarefna Breytingar á eiginleikum geta einnig gert sér grein fyrir þrívíddarhæðargagnageymslu og þrívíddar örvinnslu í hvaða átt sem er, sem hefur hátt notkunargildi. Talið er að með frekari þróun véla, efna, leysitækni o.s.frv., sem tengist fjölljóseinda confocal smásjá, muni fleiri Photonic confocal leysir skönnun smásjár fá meiri þróun og víðtækari notkun.
Ókostirnir eru sem hér segir:
1. Það getur aðeins myndað flúrljómun.
2. Ef sýnið inniheldur litninga sem geta tekið í sig örvunarljós, eins og litarefni, getur sýnið skemmst af hita.
3. Upplausnin minnkar aðeins. Þó að það sé hægt að bæta það með því að nota confocal holur á sama tíma, þá verður merkjatap.
4. Takmarkaður af dýrum ofurhröðum leysigeislum, kostnaður við fjölljóseindaskönnunarsmásjár er tiltölulega hár.
