Líffræðileg smásjá varðandi rúmmál vefjablokka
Líffræðileg smásjárskoðun Hingað til eru köld festing, frosin örþunn sneiðing og frostþurrkun venjubundnar aðferðir við röntgengeislun á vefjum og frumum. Eftirfarandi eru upplýsingar um þessa aðferð:
Líffræðilegar smásjár. Fyrir smásjár með eimsvala er hægt að færa eimsvalann upp og niður til að ná hóflegri birtu. Að auki er hægt að breyta ljósopi breytilegra ljósdíóða til að ná hóflegu 9b birtustigi. Ef ljósið er bjart er hægt að hækka eimsvalann á viðeigandi hátt og stækka ljósop breytilegra ljóssins á viðeigandi hátt. Ef ljósið er of sterkt er hægt að lækka eimsvalann á viðeigandi hátt og minnka ljósop þverljósgeislans á viðeigandi hátt. Ef þér finnst enn töfrandi við þessar aðstæður geturðu valið viðeigandi síu og sett hana á festinguna undir eimsvalanum. Þannig geturðu fengið birtustigið sem fullnægir þér. Það þarf auðvitað ákveðinn tíma til að æfa sig til að öðlast reynslu í að stilla upp og niður stöðu eimsvalans til að ná breytilegri ljósopsstærð og velja viðeigandi síur.
Mjög mikilvægt atriði í líffræðilegri smásjárskoðun er að á meðan á söfnun og aðskilnaði frumna stendur, eftir frostþurrkun og innfellingu plastefnis (FD), eftir frystingu ofurþunnar kögglum og eftir frostþurrkun, verður 65 frumefni hvers hlutar. vera greind mjög vandlega og algerlega Ekki skemma frumurnar sem á að greina. Vegna þess að röntgen örsvæðisgreining felur ekki aðeins í sér mörg skref heldur kostar hún líka mikið. Ef eftir langan tíma og mörg skref eru greindar frumur skemmdar frumur eða dauðar frumur, væri leitt að draga rangar ályktanir. Til dæmis eru hjartavöðvafrumur einangraðar eftir kollagenasameðferð með tvenns konar lögun, önnur er löng stangalaga og hin er kringlótt. Þær síðarnefndu eru deyjandi frumur sem skemmast við einangrun frumna.
Líffræðileg smásjárskoðun Innihald og dreifing raflausna í þessum tveimur tegundum frumna er mjög mismunandi. Na er mjög hátt og K er mjög lágt í kringlóttum hjartavöðvafrumum og Ca styrkur í línulegum greinum er mjög hár. Eftir að hafa athugað með öðrum greiningaraðferðum var sannað að hátt Na og lágt K í kringlóttum frumum og hátt ca í hvatberum stafaði af skemmdum á frumuhimnunni við frumuaðskilnaðinn. Kaldafestingaraðferð frumna og vefja er oft að slökkva þær fyrst og laga þær og geyma þær síðan í fljótandi köfnunarefni. Slökkun og festing eru mjög mikilvæg fyrir varðveisluáhrifin. Lifandi frumur eða ferskir vefir eru ríkir af vatni. Þegar slökkt er, eru þeir hlutar frumna eða vefja sem eru í beinni snertingu við frystiefnið (sérstaklega þegar slökkt er með fljótandi köfnunarefni) fyrst frystir og festir, þannig að myndast "skel", sem hindrar miðhluti frumanna var mulinn. og kalt fast. Þess vegna, þegar X-line örsvæðisgreining er gerð, kemur oft í ljós að það eru ískristallar í miðju stærri frumna. Til að koma í veg fyrir að þetta gerist er efni með hærra bræðslumark en fljótandi köfnunarefni en lægri þurrkur -806c notað sem mulinn kælimiðill. Mörg slík efni eru til, en það auðveldasta og ódýrasta er þétt própan (suðumark - 42.120c, bræðslumark - 187.10c, mólþungi 44.1), og kælihraði er einnig sá hraðasti. En ókosturinn er sá að hann er eldfimur.
Líffræðileg smásjá getur sett vöðvaþræðina á sérstakan ramma. Þegar vöðvaþráðasamdrátturinn nær ákveðnum fasa og þarf að laga þá er stúturinn ræstur strax til að sprauta fljótandi própani á vöðvaþræðina til að slökkva og laga hann. Síðan voru vöðvaþræðir ásamt grindinni teknir út og settir í fljótandi köfnunarefni. Ef blóðfrumur eða aðskildar frumur eru festar skal fyrst skilvinda á lágum hraða til að einbeita frumunum, flytja frumurnar í lítið silfurrör með góða hitaleiðni, setja rörið í fljótandi própan og frysta til að festa það. Þegar rottubrisið er fest á Hall rannsóknarstofunni, forkældu fyrst stálkubbanana tvo með fljótandi helíum (eða fljótandi köfnunarefni), klemmdu koparblokkina tvo með töngum og settu þá fyrir og eftir brisið til að slökkva og festa legkirtilinn. . Hægt er að slökkva og festa vefi eða frumur og síðan flytja þær yfir í fljótandi köfnunarefni til langtímageymslu.
