Undirbúningur og athugun lífsýnis með því að nota rafeindasmásjár
Upplausn smásjár fer eftir bylgjulengd ljóssins sem notað er. Rafeindasmásjáin, sem kom fram árið 1933, notar rafeindageisla með mun styttri bylgjulengd en sýnilegt ljós sem ljósgjafa. Þetta bætir upplausn hennar til muna samanborið við sjónsmásjár. Mismunur á ljósgjöfum leiðir einnig til þess að greina á milli rafeindasmásjáa og ljóssmásjáa.
Byggt á mismunandi reglum um rafeindageislamyndun og hvernig geislinn hefur samskipti við sýni, hafa nútíma rafeindasmásjár þróast í margar gerðir. Þeir sem oftast eru notaðir eru rafeindasmásjár (TEM) og skanna rafeindasmásjár (SEM). Heildarstækkun TEM getur verið á bilinu 1000 til 1.000.000 sinnum, en SEM er á bilinu 20 til 300.000 sinnum. Þessi tilraun kynnir aðallega undirbúning sýnis fyrir rafeindasmásjár og skanna rafeindasmásjár.
II. Tæki og efni
Stofn:Escherichia colihallamenning
Lausnir og hvarfefni: Formvar, óblandaðri brennisteinssýra, algert etanól, dauðhreinsað vatn, 2% vatnskennd natríumfosfówolframatlausn (pH 6,5–8,0), 0,3% pólývínýlformleg lausn (leyst upp í klóróformi), cýtókróm C, ammoníumasetat, plasmíð pBR322.
Tæki og vistir: Hefðbundin sjónsmásjá, koparrist, Buchner trekt, bikarglas, petrískál, dauðhreinsuð dropatæki, dauðhreinsuð töng, krufningarnál, glerrennibraut, blóðfrumnamælir, lofttæmi uppgufunartæki, þurrkari með mikilvægum punktum o.s.frv.
III. Starfsferlar
(1) Sýnaundirbúningur og athugun fyrir rafeindasmásjárskoðun
Meðhöndlun á málmgrindum Sýni fyrir sjónsmásjárskoðun eru skoðuð á glærum. Hins vegar, fyrir sendingarrafeindasmásjárskoðun, geta rafeindir ekki komist í gegnum gler, svo möskva hvarfefni, almennt þekkt sem sýnishorn, eru notuð í staðinn. Sýnatöflur eru fáanlegar í ýmsum forskriftum eftir efni og lögun. Koparnet með 200–400 möskva eru mest notuð. Koparrist verður að þrífa fyrir notkun til að fjarlægja mengunarefni, annars hefur það áhrif á gæði stuðningsfilma og skýrleika smásjármynda. Þessi tilraun tekur upp 400 möskva koparrist, meðhöndluð á eftirfarandi hátt: Leggið fyrst í Formvar lausn í nokkrar klukkustundir, skolið endurtekið með eimuðu vatni, þurrkið síðan af með því að liggja í bleyti í algeru etanóli. Ef ristin haldast óhrein eftir ofangreind skref skaltu bleyta þau í þynntri óblandaðri brennisteinssýru (1:1) í 1–2 mínútur, eða sjóða þau í 1% NaOH lausn í nokkrar mínútur. Skolaðu vandlega með eimuðu vatni, þurrkaðu af í algeru etanóli og settu til hliðar til síðari notkunar.
