Tvær algengar aðferðir við smásjárskoðun
1. Athugun á myrkri sviðum
Athugun á myrkri sviðum notar dökksviðslýsingu. Ólíkt athugun á björtu sviðum er ljósið ekki skoðað beint; aðeins ljósið sem endurkastast eða dreifist af sýninu greinist. Fyrir vikið hefur sjónsviðið dökkan bakgrunn á meðan sýnið virðist bjart.
Athugun á myrkri sviðum byggir á Tyndall áhrifum í ljósfræði. Rykagnir eru ósýnilegar fyrir mannsauga við beinu sterku ljósi vegna ljósbrots. Þegar ljós slær á agnirnar skáhallt, gerir endurkast ljóssins að agnirnar virðast stækkaðar og sýnilegar.
Sérstakur aukabúnaður sem þarf til að fylgjast með dökkum sviðum er dökksviðsþétti. Það kemur í veg fyrir að ljósgeislinn fari lóðrétt upp í gegnum sýnishornið. Þess í stað vísar það ljósinu til að lýsa upp sýnishornið í skáhalla horninu. Lýsandi ljósið fer ekki beint inn í linsuna á hlutlinsunni og bjartar myndir myndast af endurkastuðu og dreifðu ljósi frá yfirborði sýnisins. Upplausn athugunar á dökkum sviðum er mun hærri en við athugun á björtu sviðum og nær 0,02–0,004 μm.
2. Fasa-andstæða smásjárskoðun
Í þróun ljóssmásjáa táknar uppfinningin á fasa-andstæða smásjársmásjá stórt afrek í nútíma smásjá. Mannlegt auga getur aðeins greint bylgjulengd (lit) og amplitude (birtustig) ljósbylgna. Fyrir litlaus og gagnsæ líffræðileg sýni fer ljós í gegnum með litlum breytingum á bylgjulengd eða amplitude, sem gerir það að verkum að erfitt er að fylgjast með þeim við birtusviðsskilyrði.
Fasa-andstæða smásjárskoðun framkvæmir skoðun sem byggist á ljósleiðarmun sýnisins. Það notar á áhrifaríkan hátt truflun ljóss til að umbreyta fasamun (ósýnilegur mannsauga) í aðgreinanlegan amplitude mismun. Jafnvel litlaus gagnsæ efni er hægt að sjá greinilega. Þetta auðveldar mjög athugun á lifandi frumum, þannig að fasa-andstæða smásjárskoðun er mikið notuð með öfugum smásjám.
Grundvallarreglan í fasa-andstæða smásjánni er að umbreyta ljósleiðarmun sýnilegs ljóss sem berst í gegnum sýnishornið í amplitude mismun, þannig að bæta andstæðan milli mismunandi mannvirkja og gera þau greinilega sýnileg. Eftir að hafa farið í gegnum sýnishornið brotnar ljósið, víkur frá upprunalegu leiðinni og seinkar um 1/4 af bylgjulengd. Viðbótarskerðing eða framgangur um 1/4 bylgjulengd leiðir til þess að heildar sjónleiðsmunur er 1/2 bylgjulengd. Geislarnir tveir eru lagðir saman og trufla, auka eða minnka amplitude til að auka birtuskil. Byggingarlega séð hefur fasa-andstæða smásjáin tvo sérstaka eiginleika sem aðgreina hana frá venjulegum ljóssmásjáum.
