Tveggja ljóseinda flúrljómunarsmásjá hefur marga kosti:
1) Lengri bylgjulengdir ljóss verða fyrir minni áhrifum af dreifingu en styttri bylgjulengdir ljóss til að komast í gegnum sýnishornið;
(2) Flúrljómandi sameindir utan brenniplansins eru ekki spenntar þannig að meira örvunarljós geti náð brenniplaninu, þannig að örvunarljósið komist dýpra inn í sýnið;
3) Lengri bylgjulengdir nær-innrauðs ljóss eru minna eitruð fyrir frumur en styttri bylgjulengdir;
4) Þegar tveggja ljóseinda smásjá er notuð til að fylgjast með sýni eru ljósbleiking og ljóseiturhrif aðeins til staðar á brenniplaninu. Þess vegna henta tveggja ljóseinda smásjár betur en einljóseinda smásjár til að fylgjast með þykkum sýnum, til að fylgjast með lifandi frumum eða til að framkvæma blettaljósbleikjatilraunir.
Þekking á confocal flúrljómun smásjá
Grundvallarreglan um confocal flúrljómunarsmásjá: punktljósgjafi er notaður til að geisla sýnið og myndar lítinn, vel afmarkaðan ljóspunkt á brenniplaninu. Flúrljómunin sem gefin er frá sér frá þessum stað eftir geislun er safnað af hlutlinsunni og send til baka í geisladofann sem samanstendur af tvíátta litspegli meðfram upprunalegu ljósleiðinni. Geislaskiptarinn sendir flúrljómunina beint til skynjarans. Bæði ljósgjafinn og skynjarinn eru hvor fyrir framan sig, sem kallast lýsingarpinhole og skynjunarpinhole, í sömu röð. Báðir hafa sömu rúmfræði, um 100-200 nm, og eru samtengdir með tilliti til ljóspunktsins á brenniplaninu, þ.e. ljóspunkturinn fer í gegnum röð linsa og getur að lokum verið fókusaður á bæði lýsandi og pinhole skynjara. Þannig getur ljós frá brenniplaninu safnast saman innan rannsakandaopsins, á meðan dreifð ljós ofan frá eða neðan brenniplansins er lokað fyrir utan rannsakandaopið og ekki hægt að mynda það. Lasarinn skannar sýnishornið punkt fyrir punkt og ljósmargfaldarrörið, eftir að hafa greint pinhole, fær einnig confocal mynd af samsvarandi ljóspunkti punkt fyrir punkt, sem er breytt í stafrænt merki og sent til tölvunnar og rennur að lokum saman í skýra mynd. confocal mynd af öllu brenniplaninu á skjánum.
Hver brenniplansmynd er í raun sjónræn þversnið af sýninu og þessi sjónræni þversnið hefur alltaf ákveðna þykkt, einnig þekkt sem sjónblað. Þar sem ljósstyrkur við brennipunktinn er miklu meiri en í brennipunktinum, og ljósið sem ekki er brennivíti er síað út af nálgatinu, er dýpt sjónsviðs samrænu kerfisins áætluð núll og skönnun meðfram stefnu Z-ássins gerir sjónsneiðmyndatöku kleift að mynda tvívíða sjónsneið af sýninu sem hægt er að fylgjast með á brennideplinum. Með því að sameina XY plan (brenniplan) skönnun og Z-ás (sjónás) skönnun, er hægt að fá þrívíddarmynd af sýninu með því að safna saman lögum af tvívíðum myndum í röð, sem eru unnin með sérhæfðum tölvuhugbúnaði.
Þetta þýðir að skynjunargatið og ljósgjafanálaholið eru alltaf fókusaðir á sama punkti, þannig að flúrljómun sem örvað er utan brenniplansins kemst ekki inn í skynjunargatið.
Vinnureglan um leysir confocal er einfaldlega tjáð að það notar leysir sem ljósgjafa, á grundvelli hefðbundinnar flúrljómunar smásjá myndgreiningar, viðbótar leysir skönnun tæki og samtengd fókus tæki, í gegnum tölvustýringu til að framkvæma stafræna myndatöku og vinnslukerfi.
