Hvers konar smásjá ætti að nota til að fylgjast með bakteríum?
Ljóssmásjá er nákvæmnistæki til að stækka og skoða hluti. Mismunandi sjónsmásjár geta fylgst með mismunandi gerðum sýna. Notendur í atvinnugreinum eins og örverurannsóknum, plönturannsóknum og dýrarannsóknum þurfa að sjá hversu stór baktería er. Hvers konar smásjá ætti að nota við flokkun sýna er greint ítarlega í þessari grein.
Hægt er að ræða svör við þessari spurningu með tilliti til stærð baktería, upplausn augna manna og smásjár o.s.frv.
1. Frumustærð baktería er almennt á míkronstigi. Tökum Escherichia coli sem dæmi: lengdin er um 1um og breiddin er um 0.5um.
2. Upplausn vísar til lágmarksfjarlægðar á milli tveggja hlutpunkta sem hægt er að greina greinilega á milli.
Upplausn smásjáarinnar vísar til Z lágmarksfjarlægðar milli tveggja hluta punkta sem hægt er að greina greinilega eftir að smásjáin stækkar myndina.
Upplausn tækisins vísar til getu tækisins til að veita upplýsingar um örbyggingu mælda hlutans. Því hærri sem upplausnin er, því ítarlegri eru upplýsingarnar. Stækkunin umfram stækkunarmörkin er kölluð ógild stækkun og ógild stækkun getur ekki veitt nákvæmari upplýsingar um uppbyggingu.
3. Upplausn mannsauga er 0.1 mm, það er að segja að við skilyrði nægjanlegs ljóss og 1 fets fjarlægð, er lágmarksfjarlægð milli tveggja punkta sem almennt mannsauga getur greint {{4 }}.1mm.
4. Til að draga saman: Til að sjá tilvist baktería verður stækkunin að vera að minnsta kosti: 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 sinnum. Hins vegar, við þessa stækkun, er bakterían (Escherichia coli) sem sést bara lítill blettur. Til að sjá fínni upplýsingar um uppbyggingu þess verður að auka stækkun smásjáarinnar.
5. Upplausn venjulegs ljóssmásjár er takmörkuð af bylgjulengd sýnilegs ljóss (390 ~ 770nm,), almennt mun hún ekki fara yfir 1000 sinnum, sem er öfgagildi stækkunar venjulegs ljóssmásjár. Stækkun sem er meira en 1000 sinnum getur ekki veitt fínni upplýsingar um uppbyggingu, sem tilheyrir ógildri stækkun.
6. Stækkun rafeindasmásjánnar getur orðið 800,000 sinnum. Grundvallarregla þess er sú sama og venjulegrar ljóssmásjár, sem er að mynda skammbylgjulengdar rafeindabylgjur í gegnum háspennu.
Þegar þær eru stækkaðar 400 sinnum (10x, 40x) sjást bakteríur varla, heldur aðeins á stærð við nálarodd, eins og litlir punktar. Almennt stækkum við upp í 1000 sinnum (10x, 100x) til að fylgjast með. Á þessum tíma má enn sjá skýrt útlit bakteríana, jafnvel eftir sérstaka litaða flagellu. Til að stækka 1000 sinnum þarftu að nota olíulinsu. Svokölluð olíulinsa á að láta dropa af sedrusviðolíu falla á milli linsunnar og hlífðarglersins. Ljósbrotsstuðull sedrusviðsolíu er hærri en lofts, þannig að hægt er að nota stærri stækkun.
10x og 40x gefa til kynna að linsan sé stækkuð 10 sinnum og 40 sinnum. Stækkun augnglersins er margfölduð með stækkun hlutarins til að fá heildarstækkun smásjáarinnar. Hægt er að skipta um augngler og hlutlinsur í smásjám sem notaðar eru í grunnskólum og eru augnglerin yfirleitt 5x og 10x. Augnglerið í lítilli smásjá er yfirleitt aðeins 10x og ég hef séð Escherichia coli (E.coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis og Bacillus megaterium (notað til að sjá gró).
