Hvaða smásjá ætti að nota við bakteríurannsóknir
Ljóssmásjáin er mjög nákvæmt tæki til að sjá og stækka hluti. Mismunandi sjónsmásjár geta skoðað ýmsar sýnishorn. Notendur þurfa að geta séð magn bakteríustærðar á sviðum eins og örverurannsóknum, plönturannsóknum og dýrarannsóknum. Þessi grein skoðar ítarlega hvaða tegund af smásjá er best að nota þegar sýni eru flokkuð.
Stærð sýkla, skýra sjón manna, upplausn smásjár og fleiri þættir er hægt að nota til að svara þessari spurningu.
1. Bakteríufrumur hafa venjulega nokkrar míkron í þvermál. Hugleiddu stærð Escherichia coli, sem er um 1 um að lengd og 0,5 um á breidd.
2. Upplausn er minnsta fjarlægðin þar sem hægt er að greina tvo hlutpunkta greinilega frá hvor öðrum.
Minnsta fjarlægðin milli tveggja hlutpunkta sem hægt er að greina greinilega þegar smásjáin stækkar myndina er nefnd upplausn smásjáarinnar.
Upplausn tækisins lýsir getu þess til að veita upplýsingar um örbyggingu þess sem verið er að mæla. Upplýsingarnar sem gefnar eru eru ítarlegri eftir því sem upplausnin er hærri. Fyrir utan hámarksstækkunina er stækkunin kölluð ógild stækkun og ógild stækkun getur ekki leitt í ljós nákvæmari byggingarupplýsingar.
3. Minnsta fjarlægðin sem meðalauga getur greint á milli tveggja bletta er 0,1 mm, að því gefnu að það sé nóg ljós og að fjarlægðin sé meira en einn fet.
4. Að lokum verður stækkunin að vera að minnsta kosti: 0.1mm 0.5um=1000 5=200 sinnum til að greina tilvist sýkla. Hins vegar er bakterían (Escherichia coli) sem sést við þessa stækkun aðeins smá blettur. Stækkun smásjáarinnar verður að stilla til að sjá fínni uppbyggingaratriði.
5. Bylgjulengd sýnilegs ljóss (390–770 nm) setur takmörk á upplausn venjulegra ljóssmásjáa, sem kemur oft í veg fyrir að þær stækki meira en 1,000 sinnum. Stækkun sem er meira en 1000 sinnum telst ógild stækkun og geta ekki boðið upp á fínni byggingarupplýsingar.
6. Rafeindasmásjáin hefur 800,000-falda stækkunargetu. Það vinnur á sömu grundvallarforsendum og venjuleg sjónsmásjá, sem er að nota háspennu til að framleiða skammbylgjulengdar rafeindabylgjur.
Bakteríur sem eru bara á stærð við nálarodd og birtast sem smáir punktar er varla hægt að greina þegar þær eru stækkaðar 400 sinnum (10x, 40x). Til þess að sjá stækkum við venjulega allt að 1000 sinnum (10x, 100x). Jafnvel með því að bæta við sérstökum lituðum flagella er útlit bakteríunnar enn greinilega sýnilegt á þessum tímapunkti. Þú þarft olíulinsu til að stækka 1000 sinnum. 'Olíuslinsan' krefst þess að setja dropa af sedrusviðolíu á milli hlífðarglersins og hlutlinsunnar. Vegna þess að sedrusviðolía hefur meiri ljósbrotsstuðul en loft er hægt að nota meiri stækkun.
Tölurnar 10x og 40x tákna 10x og 40x stækkun linsunnar, í sömu röð. Til að ákvarða heildarstækkun smásjáarinnar, margfaldaðu stækkun augnglersins með stækkun hlutlægsins. Smásjárnar sem notaðar eru í grunnskólum eru meðal annars skiptanleg augngler og hlutlinsur; augnglerin eru venjulega 5x og 10x. Ég hef fylgst með Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis og Bacillus megaterium með því að nota örsmáa smásjá með augngleri sem er oft aðeins 10x. (notað til að sjá gró).
